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2主要參數(shù)設(shè)置的技巧
2.1方法類型可根據(jù)試劑盒要求或反應(yīng)原理來設(shè)置。對于半自動(dòng)生化分析儀終點(diǎn)法只是一點(diǎn)終點(diǎn)法,全自動(dòng)生化儀單試劑選擇一點(diǎn)終點(diǎn)法,而雙試劑選擇兩點(diǎn)終點(diǎn)法。大多數(shù)酶學(xué)測定使用速率法,尿素氮、肌酐測定等用兩點(diǎn)法。
2.2生化儀超純水設(shè)備技術(shù)測定波長選擇有三個(gè)主要條件:
(1)待測物質(zhì)在該波長下的光吸收最大。
(2)其吸收峰宜較寬而鈍。
(3)常見干擾物在該波長下的光吸收最小。試劑盒說明一般已提供波長參數(shù)。有些儀器波長選擇受濾光片數(shù)量限制,應(yīng)該就近選擇為原則。
2.3測定溫度一般全自動(dòng)生化儀都是37℃,而半自動(dòng)生化儀有室溫、25~C、30cc、37~C等,終點(diǎn)法由于反應(yīng)在機(jī)外進(jìn)行,選擇室溫可以減少儀器溫度調(diào)整時(shí)間,提高工作效率,而速率法和兩點(diǎn)法都選擇37℃比較合適。
2.4吸液量主要是針對流動(dòng)比色的全自動(dòng)或半自動(dòng)儀器的參數(shù),原則是吸人量不得大于或等于反應(yīng)液總體積,否則會(huì)導(dǎo)致吸空形成比色池氣泡,最好留100~200ul的余地。
2.5標(biāo)準(zhǔn)液濃度終點(diǎn)法和兩點(diǎn)法必須設(shè)置標(biāo)準(zhǔn),選擇合格的標(biāo)準(zhǔn)品很重要。有些試劑盒配有標(biāo)準(zhǔn)液,但是部分項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)液定標(biāo)偏差太大,我們使用的是干粉復(fù)合羅氏校準(zhǔn)液,復(fù)溶后分裝冷凍保存,只要復(fù)溶的水質(zhì)保證,避免反復(fù)凍融,校準(zhǔn)的結(jié)果還是很滿意的。注意校準(zhǔn)液靶值獲得的方法學(xué),方法不同耙值是有差異的,比較典型的是ALP測定有IFCC和DGKC法,差異比較大,不可簡單套用。2.9 K值速率法測定無需帶標(biāo)準(zhǔn)或做標(biāo)準(zhǔn)曲線,首先確定樣本量和工作試劑量,再根據(jù)被測物質(zhì)的摩爾消光系數(shù),就可按速率法計(jì)算公式計(jì)算出因素K值了。K=TV×10。/(8×SV XL),TV為反應(yīng)液總體積,sV為樣本體積,L為比色杯光徑(em),£為毫摩爾消光系數(shù)。
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