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選擇適合的培養(yǎng)基:根據實驗目的和細胞特性,選擇適合的培養(yǎng)基,如DMEM、RPMI-1640、F-12、 McCoys 5A等。
滅菌處理:將培養(yǎng)基滅菌處理,如使用UV輻射或過濾器滅菌,以避免培養(yǎng)基中存在細菌和病毒等微生物。
調整 PH 值:使用 NaOH 或 HCl 調整培養(yǎng)基的 PH 值,確保培養(yǎng)基的 PH 值符合實驗要求,一般在 pH 7.2-7.4 之間。
添加必需元素:根據實驗需要,添加必需元素,如胍紅素、葉酸、丙酮酸、煙酰胺等。
滅菌和過濾:將培養(yǎng)基滅菌處理,如使用 UV 輻射或過濾器滅菌,以避免培養(yǎng)基中存在細菌和病毒等微生物。
加溫:將培養(yǎng)基加溫至 37 ℃,以適應細胞生長的溫度需求。
細胞接種:將細胞接種到培養(yǎng)基中,確保細胞數(shù)量和密度符合實驗要求。
培養(yǎng):在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)細胞,根據實驗需要,定期更換培養(yǎng)基,確保細胞生長和生存的需求。
觀察和記錄:定期觀察細胞的生長和生存狀態(tài),記錄實驗數(shù)據,評估實驗結果。
結束實驗:實驗結束后,應及時處理細胞和培養(yǎng)基,避免培養(yǎng)基污染和細胞污染。
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