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電泳儀基本原理
發(fā)布日期:2024-11-21 | 瀏覽次數(shù):

帶電粒子:電泳分析的對(duì)象通常是帶電的生物大分子,如帶負(fù)電的DNA分子和帶正電的蛋白質(zhì)分子。

電場(chǎng):當(dāng)樣品置于電泳儀中,會(huì)在樣品和電極之間施加一個(gè)恒定的電壓,從而產(chǎn)生一個(gè)均勻的電場(chǎng)。

遷移速率:在電場(chǎng)的作用下,帶電粒子會(huì)沿著電場(chǎng)方向移動(dòng)。粒子的遷移速率取決于其電荷量、分子大小和形狀、介質(zhì)的粘度等因素。

分離機(jī)制:

電荷效應(yīng):不同分子的電荷量不同,導(dǎo)致它們?cè)陔妶?chǎng)中的遷移速率不同,從而實(shí)現(xiàn)分離。

分子篩效應(yīng):在凝膠電泳中,分子通過(guò)凝膠孔隙時(shí),較小的分子可以更快地通過(guò)孔隙,而較大的分子則被阻礙,因此根據(jù)分子大小實(shí)現(xiàn)分離。

介質(zhì)(支持物):電泳通常在某種介質(zhì)中進(jìn)行,這種介質(zhì)可以是固體凝膠(如聚丙烯酰胺凝膠)、瓊脂糖凝膠、紙或其他多孔材料,也可以是無(wú)孔的緩沖溶液。

緩沖系統(tǒng):電泳過(guò)程中需要使用緩沖液來(lái)維持pH值的穩(wěn)定,防止電泳過(guò)程中pH的變化影響帶電粒子的電荷狀態(tài)。

檢測(cè):電泳完成后,可以通過(guò)染色、熒光標(biāo)記、紫外光照射等方式檢測(cè)和分析分離的分子。

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